重症肌无力（MG）是一种由自身抗体介导的神经-肌肉接头（NMJ）传递障碍的自身免疫性疾病，致病性乙酰胆碱受体（AChR）抗体和肌肉特异性受体酪氨酸激酶（MuSK）抗体是主要责任抗体。
在重症肌无力中，AChR抗体阴性的重症肌无力称为血清阴性重症肌无力（SNMG）。约10% - 15% MG患者虽有典型临床症状、神经肌肉传导障碍且抗胆碱酯酶治疗有效，但血清中检测不到AchR抗体，即为SNMG。
1、症状特点：
与典型MG相似，SNMG患者全身骨骼肌均可受累，具有波动性无力和病理性疲劳的特点，表现为骨骼肌无力、易疲劳，活动后加重，休息和应用胆碱酯酶抑制剂后症状缓解、减轻，症状亦呈“晨轻暮重”。
2、常见受累肌群：
眼外肌：最易受累，表现为对称或非对称性上睑下垂和/或双眼复视，是常见首发症状，可见于80%以上患者，还可出现交替性上睑下垂、双侧上睑下垂和眼球活动障碍等，瞳孔大小及对光反应正常。
面肌：受累可致鼓腮漏气、眼睑闭合不全、鼻唇沟变浅、苦笑或呈肌病面容。
咀嚼肌：受累可致咀嚼困难。
咽喉肌：受累出现构音障碍、吞咽困难、鼻音、饮水呛咳及声音嘶哑等。
颈肌：受累以屈肌为著，出现头颈活动障碍、抬头困难或不能。
肢体肌肉：各组肌群均可出现肌无力症状，以近端为著。
呼吸肌：受累可致呼吸困难、无力，部分患者可出现肌无力危象，需行人工辅助呼吸。
1、抗体检测阴性增加诊断难度：
约10% - 15%的MG患者血清中检测不到AChR抗体。传统的标准AChR放射免疫沉淀分析（RIA）可检测约80% - 85%的全身型MG患者和65%的眼肌型MG患者的抗体，特异性为97% - 99%，但对于AChR阴性MG患者，检测存在局限性，容易漏诊或误诊。
2、缺乏特异性诊断标志物：
目前尚无针对SNMG的特异性诊断标志物，除AChR抗体外， MuSK抗体、低密度脂蛋白受体相关蛋白4（LRP4）抗体等在SNMG患者中的阳性率也不高，且这些抗体检测结果的解读较为复杂，不同检测方法和实验室之间的结果可能存在差异，给诊断带来困难。
3、临床表现不典型增加诊断复杂性：
部分SNMG患者的临床表现可能不典型，与其他神经肌肉疾病有相似之处，如Lambert - Eaton综合征、慢性炎性肌病、眼肌型肌营养不良、进行性延髓麻痹、肉毒杆菌中毒等，需要进行细致的鉴别诊断。例如，Lambert - Eaton综合征男性患者居多，约2/3患者伴发癌肿，以下肢近端肌无力为主，活动后即疲劳，但短暂用力收缩后肌力反而增强，而持续收缩后又呈疲劳状态，脑神经支配的肌肉很少受累，约半数患者伴有自主神经症状，新斯的明试验可呈阳性但不如重症肌无力典型，重复神经刺激的特征性改变为低频重复神经电刺激时波幅呈递减，而高频重复神经电刺激时波幅呈递增且递增程度均在100%以上，血清AChR抗体阴性，用盐酸胍治疗可使ACh释放增加而使症状改善；慢性炎性肌病可有全身反应现象，如肌肉压痛，血清肌酶明显增高，肌电图提示明显的肌源性受损，但无晨轻暮重现象，重复神经电刺激阴性，血清AChR抗体滴度不高，抗胆碱酯酶药物治疗无效等。这些疾病与SNMG的症状重叠，增加了诊断的复杂性。
4、诊断方法的局限性：
新斯的明试验、腾喜龙试验等传统诊断方法虽对MG诊断有重要意义，但对于SNMG患者，这些试验结果可能不典型或难以准确判断。低频重复神经电刺激（RNS）和单纤维肌电图等电生理检查也存在一定局限性，如RNS检查服用胆碱酯酶抑制剂的患者需停药12 - 18h后进行，且要充分考虑病情，单纤维肌电图敏感性较高，但操作复杂，结果判断受多种因素影响。
国内首家重症肌无力活细胞（L-CBA）
抗体检测应用助力诊断SNMG
众所周知，CBA法因其方法学的独特性，在抗体检测方面具有“灵敏性高，特异性强”的特质。在天海新域参与“SCREAM”研究（NCT05219097，发表于The Lancet Regional Health - Western Pacific , 2023）中证实，Fixed-CBA法在检测AChR抗体和MuSK抗体方面已展现出显著优势。如今，天海新域研发团队经过两年的潜心研发与验证，正式推出更具突破性的“Live-CBA检测重症肌无力抗体试剂”，成为国内首家将Live-CBA技术应用于重症肌无力抗体检测的实验室，为重症肌无力的精准诊断提供全新解决方案。
Live-CBA（活细胞免疫荧光法）是国际神经免疫领域的前沿技术，其核心优势在于使用“活细胞”作为检测载体。与传统的Fixed-CBA法相比，Live-CBA法使用的细胞保持自然活性，细胞膜和受体结构更接近体内原生状态，能够更好地模拟真实的免疫反应。这一技术突破使得Live-CBA在检测低滴度抗体和特定类型抗体方面具有显著优势。
在牛津大学2022年发表的一篇文章中证实，大约1/3AChR抗体和MuSK抗体放免双阴性的患者中通过活细胞方法会检测出AChR, MuSK抗体。并且文章还提到，活细胞CBA检测对于MG诊断是很有帮助的，推广该检测方法是非常重要的。
图1：在放免双阴性的病人中利用活细胞检测聚集性AchR, Musk, LRP4，评估其检出率。抗体检出率为：AchR: 16（19.5%），4个单纯胎儿型；Musk: 7（8.5%），LRP4: 0。
多项前沿研究证实，Live- CBA能检测出聚集性AChR抗体等多种抗体，提高了SNMG患者诊断率，尤其在儿科和眼科病例中效果显著。
五
天海新域：引领重症肌无力诊断新纪元
本次推出的Live-CBA检测技术，不仅是技术上的重大突破，更是对患者精准诊疗需求的积极响应。在这一疾病的诊断上，天海新域作为神经免疫诊断领域的先行者，始终致力于推动重症肌无力诊断技术的创新与发展，为临床应用不断贡献“天海力量”，为更多罕见病患者的诊断带来更多希望。
参考文献：
[1]Damato V, Spagni G, Monte G,, et al. A. Clinical value of cell-based assays in the characterisation of seronegative myasthenia gravis. J Neurol Neurosurg Psychiatry. 2022 Sep;93(9):995-1000.
[2] Li, Z, Zhang C, Chang T, et al. A multicentre, prospective, double-blind study comparing the accuracy of autoantibody diagnostic assays in myasthenia gravis: the SCREAM study. Lancet Reg Health West Pac. 2023; 38, 100846.
[3] Gregorio S, Matteo G, Pietro B, et al. Comparison of Fixed and Live Cell-Based Assay for the Detection of AChR and MuSK Antibodies in Myasthenia Gravis. Neurol Neuroimmunol Neuroinflamm . 2022 Oct 21;10(1).
